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pcr(聚合酶链式反应)来说具有举足轻重的地位,常常被用作
dna聚合酶的引物。
pcr(聚合酶链反应,polymerase
chain
reaction)在现代分子生物学分析和遗传学中具有不可撼动的根本性基石地位。它与分子克隆和
dna
序列分析几乎构成了整个分子生物学的基础部分,它们的出现改变了人们对生命本质的理解。在现代生物科技中,这些技术的应用领域已经扩展到了各个方面,如农业、医学、法学、食品科学等,为解决许多全球性问题提供了有力支持。
pcr(聚合酶链式反应)技术作为一项具有重大影响的生物技术创新,被广泛认为是推动人类生物科学进步的重要里程碑之一。这项技术使得科学家们能够快速而高效地扩增特定的
dna
片段,从而实现对基因的检测、诊断和研究。就像所有人类伟大的发现与发明一样,pcr
技术并非凭空产生,而是在漫长的文明科学技术积累下,于某个关键时刻诞生的。这一过程如同一场绚烂的思想火花迸发,将多年来的知识和经验融合在一起,创造出了这个令人瞩目的成果。
pcr
技术的发展离不开众多科学家的努力和贡献。他们通过不断尝试和改进实验方法,逐渐完善了
pcr
的技术细节,使其成为一种可靠且广泛应用的生物技术工具。如今,pcr
技术不仅在基础科研中发挥着关键作用,还在临床医学、疾病预防控制、法医学鉴定等领域得到了广泛应用,为人类健康和社会安全做出了巨大贡献。
1971年,科拉纳和他聪慧的学生谢尔·克莱普在着名的《分子生物学杂志》上发表了一篇具有开创性意义的论文。在这篇论文里,他们首次提出了一个令人惊叹的概念:利用dna聚合酶来实现修复合成。这个概念无疑成为了后来pcr技术的早期构想,犹如一颗璀璨的星辰照亮了科学研究的天空。
科拉纳明确地指出,如果能巧妙地运用dna变性、与恰当的引物杂交,并借助dna聚合酶延伸引物等步骤,那么就有可能合成珍贵的trna基因。如此大胆而又充满创新精神的设想,让人们对核酸体外合成的可能性有了更深入的理解。然而,尽管这个设想极具前瞻性,但它却生不逢时。那时的科技水平还不足以支持这样的设想付诸实践,尤其关键的是,热稳定dna聚合酶尚未被人类所发现。这个技术缺失如同一座难以逾越的高山,使得这个伟大的设想暂时被埋没在了历史的尘埃之中。但正如每颗种子都需要等待适宜的季节才能破土而出,这个设想的价值并未因此而磨灭,而是在未来的某一天,终于绽放出绚烂的光芒。
1972年在科拉纳加盟麻省理工学院后,他领导的一个研究小组利用人造核苷酸合成了第一个人造基因。四年后,他宣布人造基因在细菌细胞内正常发挥作用。20世纪80年代,他合成了视网膜紫质基因——人类视觉中极为重要的感光蛋白质。与此同时,他还进行了与色素性视网膜炎相关的视网膜紫质突变的研究。
威斯康辛大学生物化学教授阿西姆·安萨里(aseem
ansari)说:“(遗传工程)整个发展都是基于科拉纳的化学理论,他是我的灵感来源。”
三、获得诺贝尔奖
1953年,沃森、克里克和富兰克林确定了dna的结构,这种双螺旋链状结构由四种碱基组成:腺嘌呤(a)、胸腺嘧啶(t)、胞嘧啶(c),以及鸟嘌呤(g);在rna中,尿嘧啶(u)代替了胸腺嘧啶。但是dna分子所携带的遗传信息是如何转译到蛋白质生物合成过程中的呢?
俄国物理学家乔治·伽莫夫假定,三个连续排列的核苷酸(密码子)可以定义64种氨基酸完全可以满足制造蛋白质所需的所有20种氨基酸的编码。1961年,马歇尔·尼伦伯格和j·海因里希·马太在美国国立卫生研究院一起工作,力图确定当单一种的核苷酸被加入一份反应混合液后,将形成哪种氨基酸。密码子uuu能形成苯基丙氨酸,这就破解了遗传密码的第一个字母。没过多久,c被发现能生成脯氨酸。威斯康星大学麦迪逊分校的科拉纳生成了更加复杂的序列,它由重复的双核苷酸序列构成,其起始序列是ucucuc,译解的产物是丝氨酸-亮氨酸-丝氨酸-亮氨酸...之后,其余的密码子也一一被确定。
1964年,康奈尔大学的罗伯特·霍利发现并确定了转运rna(trna)的化学结构,从而揭开了信使rna(mrna)和核糖体之间的联系。制造一个蛋白质所需的信息先是附着到trna上,然后在核糖体中根据mrna进行转译。每个trna只会识别mrna上的一个密码子,而且每个trna只会携带20种氨基酸的其中一种。蛋白质是由氨基酸一个个拼接而成的。尼伦伯格、科拉纳和霍利共同获得了1968年的诺贝尔奖。
1966年科拉纳加入美国国籍。1970年,科拉纳离开威斯康辛大学去了麻省理工学院,并一直工作到2007年退休。
2011年11月9日,科拉纳在美国马萨诸塞州康科德城去世,享年89岁。
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